LB培养基是最常用的细菌培养基之一。由于其良好的生物学性能和经济性,被广泛用于细菌的生物学实验中。下面介绍LB培养基的制备步骤以及配方参数。
LB培养基的配方
上述卤盐(tryptone和yeast extract)和氯化钠均为培养基的干粉,所有试剂均应按标准分配和称量。LB的配方如下: 1. tryptone: 10 g/L 2. yeast extract: 5 g/L 3. NaCl: 10 g/L
LB培养基制备步骤
步骤1:加LB粉末
按照上述配方,将每个试剂以正确比例加入纯化水中,并在自动搅拌器中搅拌20 min,直到完全溶解并达到理想的透明度。
步骤2:灭菌
利用自己的工作实验室实验室设备对培养基进行高压蒸汽灭菌,即121℃,15-20 PSI压力和20-30分钟时间下的高温处理。
步骤3:存储和管理
灭菌液体培养基应在4℃下存放,并保持暗存储,以避免紫外线,光线等光敏试剂的光化学作用。
注意事项
1、配制LB只需使用高品质的水;
2、不要使试剂粉末接触皮肤,如果接触,则立即用水冲洗;
3、培养基的溶液颜色为琥珀色,如果太深了,那么你可能加太多试剂粉末了;
4、为了降低pH ,可以添加0.1 mol/L HCl,在pH值达到期望值后,用氢氧化钠调节到所需的pH值。